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來源:第一財(cái)經(jīng)    發(fā)布時(shí)間:2021-11-03 13:30:08

作為新冠疫情防控利器,核酸檢測(cè)也面臨著“假陽性”或者“假陰性”的困擾。如何保證新冠核酸檢測(cè)的質(zhì)量,成為必須面對(duì)的問題。

雖然新冠核酸檢測(cè)假陽性是正常屬性,但如何盡可能減少“假陽性”,一直受到高度重視。

在新冠核酸檢測(cè)中,有做了N次檢測(cè)才陽性的情況;也有檢測(cè)“陽性”,全民動(dòng)員找密接者,結(jié)果發(fā)現(xiàn)是實(shí)驗(yàn)室污染導(dǎo)致的“假陽性”。

例如,9月23日,江蘇省徐州市衛(wèi)健委在途經(jīng)徐州東站的G362/G359次列車上(為同一趟列車不同編號(hào),西安-徐州-南京-無錫-蘇州-上海虹橋)發(fā)現(xiàn)1名乘客新冠病毒核酸檢測(cè)結(jié)果“陽性”。徐州市有關(guān)部門接報(bào)后迅速開展現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查處置,使用負(fù)壓救護(hù)車將其轉(zhuǎn)運(yùn)至定點(diǎn)收治醫(yī)院;對(duì)排查出的176名密切接觸者全部進(jìn)行集中隔離醫(yī)學(xué)觀察和核酸檢測(cè);對(duì)相關(guān)場(chǎng)所和環(huán)境進(jìn)行了徹底的終末消毒。進(jìn)而多地展開防控行動(dòng),如揚(yáng)州發(fā)布當(dāng)即緊急尋人信息等。不過,最終復(fù)核信息顯示:初步判斷該樣本因在第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室受到質(zhì)控品污染而導(dǎo)致“陽性”。

“假陽性的存在,會(huì)導(dǎo)致新冠防控成本增加,也影響民眾的正常生活。”一位核酸診斷試劑的專家表示。

那么,究竟是什么因素導(dǎo)致核酸檢測(cè)“不夠靠譜”?

在10月30日的國(guó)務(wù)院聯(lián)防聯(lián)控新聞發(fā)布會(huì)上,國(guó)家衛(wèi)生健康委醫(yī)政醫(yī)管局監(jiān)察專員郭燕紅表示,核酸檢測(cè)對(duì)于疫情防控發(fā)揮著重要作用,因此,提高核酸檢測(cè)能力和加強(qiáng)質(zhì)量控制至關(guān)重要。制定完善相應(yīng)的技術(shù)規(guī)范、開展核酸檢測(cè)人員的培訓(xùn),同時(shí)強(qiáng)化室內(nèi)質(zhì)控和質(zhì)間評(píng)價(jià),要求各個(gè)實(shí)驗(yàn)室都要做好室內(nèi)質(zhì)量控制,每一批檢測(cè)都至少要有弱陽性和陰性的質(zhì)控品投放到臨床樣品當(dāng)中,一起參與提取和擴(kuò)增,通過室內(nèi)的質(zhì)控工作加大實(shí)驗(yàn)室每批次核酸檢測(cè)的質(zhì)量管理。

“從今年年初到目前,已經(jīng)開展了9批次室間質(zhì)評(píng)工作,室間質(zhì)評(píng)結(jié)果都進(jìn)行反饋,對(duì)于不合格的機(jī)構(gòu)也都進(jìn)行整改。通過室間質(zhì)評(píng),質(zhì)評(píng)的結(jié)果合格率都保持在98.5%以上。”郭燕紅表示。

不過,高達(dá)98.5%的合格率也無法避免假陽性的出現(xiàn)。出現(xiàn)假陽性的原因是什么?“主要是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室擴(kuò)增階段的污染導(dǎo)致。”一位業(yè)內(nèi)專家表示。目前主流熒光PCR法,其陽性質(zhì)控物等擴(kuò)增產(chǎn)物若處理不當(dāng)極易形成氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境從而導(dǎo)致“假陽性”檢測(cè)結(jié)果,且短期內(nèi)很難清除。

“目前,對(duì)于陽性樣本,我們都需要進(jìn)行復(fù)核,復(fù)核的過程一般是通過更換不同的試劑,但目前新冠試劑大多都采用相同的引物探針序列,擴(kuò)增區(qū)域大同小異,實(shí)際上也不能很好解決擴(kuò)增產(chǎn)物污染問題。建議選用非PCR方法,比如RNA恒溫?cái)U(kuò)增方法。該方法原理與PCR不同,只能從RNA開始擴(kuò)增,PCR產(chǎn)生的DNA擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)其沒有影響,因此可以用其對(duì)PCR結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,排除PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的干擾。

國(guó)家衛(wèi)生健康委聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制5月14日發(fā)布的《關(guān)于印發(fā)新型冠狀病毒肺炎防控方案(第八版)的通知》稱,新冠病毒核酸檢測(cè)方法主要是實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法,此方法含有兩個(gè)靶點(diǎn),ORF1ab與核殼蛋白N。在病例確認(rèn)上規(guī)定:實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)陽性病例需滿足以下兩個(gè)條件中的一個(gè):條件一,同一份標(biāo)本中新冠病毒2個(gè)靶標(biāo)(ORF1ab、N)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)結(jié)果均為陽性。如果出現(xiàn)單個(gè)靶標(biāo)陽性的檢測(cè)結(jié)果,則需要重新采樣,重新檢測(cè);條件二,兩種標(biāo)本實(shí)時(shí)熒光RT-PCR同時(shí)出現(xiàn)單靶標(biāo)陽性,或同種類型標(biāo)本2次采樣檢測(cè)中均出現(xiàn)單個(gè)靶標(biāo)陽性的檢測(cè)結(jié)果,可判定為陽性。

很多專家認(rèn)為,“靶標(biāo)多”可能是導(dǎo)致“假陽性”和“假陰性”的原因之一。

“靶子越多,越容易命中,這是個(gè)生活中的常規(guī)邏輯,但涉及到科學(xué)技術(shù)細(xì)節(jié),事實(shí)并非如此。核酸檢測(cè)是一個(gè)復(fù)雜而精密的生物學(xué)過程,需要檢測(cè)的靶標(biāo)越多,用到的原料越復(fù)雜,相互干擾也越大,會(huì)影響靈敏度,導(dǎo)致‘假陰性’。靶標(biāo)越多,擴(kuò)增出DNA產(chǎn)生污染的概率也越大,出現(xiàn)‘假陽性’的可能性也就大了。所以,檢測(cè)用雙靶,脫靶或誤傷的情況也會(huì)增加。”一位新冠核酸診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)的負(fù)責(zé)人表示。

國(guó)家衛(wèi)健委臨床檢驗(yàn)中心和FIND(世衛(wèi)組織創(chuàng)新診斷基金會(huì))的評(píng)價(jià)結(jié)果顯示:?jiǎn)伟袠?biāo)試劑與雙靶標(biāo)試劑性能相比,具有更高靈敏度;單靶標(biāo)試劑對(duì)陽性樣本的檢出率要高于雙靶標(biāo)試劑。

WHO發(fā)布的疑似病例檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室指南也指出,在新冠病毒流行地區(qū),檢測(cè)一個(gè)特異性靶標(biāo)已足夠。

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